DdNTPlardan foydalanishdan maqsad nima?
DdNTPlardan foydalanishdan maqsad nima?

Video: DdNTPlardan foydalanishdan maqsad nima?

Video: DdNTPlardan foydalanishdan maqsad nima?
Video: Abdulloh domla - Hayotdan maqsad nima? ishlashmi? 2024, Noyabr
Anonim

DdNTP tegishli Dideoksinukleotidlar DNK ketma-ketligi uchun turli uzunlikdagi DNK zanjirlarini ishlab chiqarish uchun Sanger dideoksi usulida qo'llaniladigan trifosfatlar. Bu DNK polimerizatsiyasi (yoki DNK cho'zilishi) jarayonining tugashiga olib keladi, chunki bu jarayon davom etishi uchun 3'-OH guruhi kerak.

Nima uchun ddNTPlar ketma-ketlikda ishlatiladi?

Dideoksinukleotidlar DNK polimeraza zanjirini uzaytiruvchi inhibitorlar; ishlatilgan DNK uchun Sanger usulida ketma-ketlik . Dideoksiribonukleotidlar 3' gidroksil guruhiga ega emas, shuning uchun bu dideoksinukleotid zanjirda bo'lganidan keyin zanjirning boshqa cho'zilishi sodir bo'lmaydi. Bu DNKning tugatilishiga olib kelishi mumkin ketma-ketlik.

Xuddi shunday, ddNTP-lar dNTP-larga ulanadimi? Bir yoki bir nechta dNTPlar replikatsiya mahsulotlarini ko'rishga yordam beradigan radioaktiv etiketkalar mavjud. Nihoyat, har bir naycha deb ataladigan to'rtta maxsus nukleotiddan birini oladi dideoksinukleotidlar ( ddNTPlar ). Biroq, DNK polimeraza kiritilgandan so'ng, zanjirni kengaytira olmaydi, chunki u 3'-OH ni talab qiladi. biriktir keyingi nukleotidga.

Xuddi shunday savol tug'ilishi mumkin: ddNTPlar ketma-ketlik reaktsiyasini qanday to'xtatadi?

Kichik miqdorda mavjud bo'lganda reaktsiyalarning ketma-ketligi , dideoksiribonukleozid trifosfatlar ( ddNTPlar ) tugatish ketma-ketlik reaktsiyasi o'sib borayotgan DNK zanjirlarida turli pozitsiyalarda. ddNTPlar ketma-ketlik reaktsiyasini to'xtatadi chunki ular: DNK polimerazasini shablon zanjiridan tushishiga olib keladi. c.

Dideoksinukleotidlarni o'z ichiga olgan qanday texnikadan foydalanish mumkin?

Sanger ketma-ketligi a usuli DNK ketma-ketligi zanjirni tugatishning selektiv kiritilishiga asoslangan dideoksinukleotidlar in vitro DNK replikatsiyasi paytida DNK polimeraza tomonidan. 1977 yilda Frederik Sanger va uning hamkasblari tomonidan ishlab chiqilgan bo'lib, u eng keng tarqalgan edi. ishlatilgan ketma-ketlik usuli taxminan 40 yil davomida.

Tavsiya: