Mundarija:

Nima uchun PCR mahsulotlarini ketma-ketlashtirishdan oldin tozalash kerak?
Nima uchun PCR mahsulotlarini ketma-ketlashtirishdan oldin tozalash kerak?

Video: Nima uchun PCR mahsulotlarini ketma-ketlashtirishdan oldin tozalash kerak?

Video: Nima uchun PCR mahsulotlarini ketma-ketlashtirishdan oldin tozalash kerak?
Video: 10-синф ХИМИЯ. Нефть ва уни кайта ишлаш 2024, May
Anonim

Istalganini tekshirish mahsulot hisoblanadi muhim , bu o'ziga xos bo'lmagan etishmasligini tasdiqlashni o'z ichiga oladi mahsulotlar va primer dimerlari. Toza -reaksiya aralashmasining yuqori darajasi ham bo'ladi zarur keyingi reaktsiyalarga xalaqit beradigan va o'qib bo'lmaydigan ketma-ketlikka olib keladigan birlashtirilmagan primerlarni va dNTPlarni olib tashlash.

Bundan tashqari, nima uchun PCR mahsulotlarini tozalash kerak?

Sen qilishing kerak PCR mahsulotlarini tozalash ligatsiyaning muvaffaqiyatini optimallashtirish uchun foydalanilmagan primerlar, nukleotidlar va fermentlardan xalos bo'lish uchun mahsulot ning PCR . Kimga tozalash the PCR mahsulotlari , o'lchamni istisno qilish xromatografiyasi qo'llaniladi.

Bundan tashqari, siz PCR mahsulotlarini endonukleaza hazm qilishni cheklashdan oldin tozalashingiz kerakmi? Ko'pchilik cheklash fermentlar faoldir PCR buferlar. Klonlash ilovalari uchun, tozalash ning Ovqat hazm qilishdan oldin PCR mahsulotlari hisoblanadi zarur tarkibida mavjud bo'lgan faol termofil DNK polimerazasini olib tashlash uchun PCR aralashmasi. DNK polimerazalari ajralgan DNKning uchlarini o'zgartirishi va ligatsiya hosildorligini kamaytirishi mumkin.

Odamlar, shuningdek, PCR mahsulotlarini ketma-ketlik uchun qanday tayyorlaysiz?

PCR mahsulotlarining to'g'ridan-to'g'ri ketma-ketligi

  1. To'g'ri fragmentni kuchaytirganingizga ishonch hosil qiling.
  2. Siz barcha qoldiq PCR primerlarini va birlashtirilmagan nukleotidlarni olib tashlashingiz kerak.
  3. Agar PCR primerlari ham ketma-ketlik astar(lar)i bo'lsa, ular bizning shartlarimizga mos kelishiga ishonch hosil qiling.
  4. Namunani ortiqcha konsentratsiya qilmang!

PCR mahsulotini ketma-ketlashtira olasizmi?

To'g'ridan-to'g'ri Ketma-ketlik ning PCR mahsulotlari . Ketma-ketlik faqat foydalanadi bitta ishlatiladigan ikkita o'rniga primer PCR . Agar shunday qilsangiz ikkala astarni ham olib tashlamang, Siz.. qilasiz ikkitasini oling ketma-ketliklar bir-birining ustiga o'qilishi mumkin bo'lmagan. a dan foydalanish OK PCR uchun primer ketma-ketlik bizning sharoitimizga mos kelsa.

Tavsiya: